胚胎体外培养需要什么环境？

时间：2023-04-01 09:21:31 来源：网络

体外细胞培养需要什么条件

环境因素

1、无菌环境

无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内，解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵，但细胞在体外培养的过程中，缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。

为保证细胞能在体外环境中生长繁殖，必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。

2、合适的温度

一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37～38℃，不适宜的环境温度会影响细胞的生长。细胞对低温的耐受能力要强于对高温的耐受能力，在低温下，细胞的代谢活力及核分裂能力降低。

若温度不低于0℃，虽然细胞代谢受到影响，但无损伤作用；25～35℃时，细胞以缓慢的速度生长；但若被置于40℃数小时，则不仅不利于细胞生存、生长，甚至可导致其死亡。

3、适宜的渗透压

高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。因此，渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。多数体外培养的细胞对渗透压都有一定的耐受能力，实际应用中，260～320mmol/L的渗透压可适用于大多数细胞。

4、气体环境与pH

细胞的体外培养需要理想的气体环境，氧气、二氧化碳是细胞生存的必要条件。氧气参与细胞的三羧酸循环，为细胞生存、代谢与合成提供能量；二氧化碳既是细胞的代谢产物，是细胞生长的必需成分，又与维持培养液的pH有关。

大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2～7.4。在开放式培养中，以5%的二氧化碳气体比例为宜。

营养条件

1、培养基

细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质，包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、维生素等。针对不同细胞的营养需求，有多种合成培养基可供选择，如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。

2、其他添加成分

在各种合成培养基提供基础营养物质之外，还需根据不同细胞和不同的培养目的添加其他成分，如血清、因子等。

血清提供的是细胞外基质、生长因子和转铁蛋白等重要物质，常用的是胎牛血清。要根据不同的细胞和不同的研究目的决定添加血清的比例。10%～20%的血清能维持细胞较快的生长增殖速度，称为生长培养液；为维持细胞缓慢生长或不死，添加2%～5%的血清即可，称为维持培养液。

但血清中也存在有害于细胞生长和繁殖的物质，如补体、免疫球蛋白和一些生长抑制因子；成分不明确，影响对结果的分析；不同动物、不同批次的血清活性差别较大，影响培养效果的稳定性。

谷氨酰胺是细胞生长重要的氮源，在细胞生长代谢过程中起重要作用，但由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定容易降解，4℃下放置7天即可分解约50%，故谷氨酰胺需在使用前添加。

扩展资料：

细胞培养分类：

1、动物细胞培养

在所有的细胞离体培养中，最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。

血清：动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里，血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。

支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃，塑料等作为支持物。

气体交换：二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节，不断维持所需要的气体条件。

2、植物细胞培养

光照：离体培养的植物细胞对光照条件不甚严格，因为细胞生长所需要的物质主要是靠培养基供给的。但光照不但与光合作用有关，而且与细胞分化有关，例如光周期可对性细胞分化和开花调控作用，所以以获得植株为目的的早期植物细胞培养过程中，光照条件特别重要。

激素：植物细胞的分裂和生长特别需要植物激素的调节，促进生长的生长素和促进细胞分裂的分裂素是最基本的激素。植物细胞的分裂，生长，分化和个体生长周期都有相应的激素参与调节。

3、微生物细胞培养

微生物多为单细胞生物，野生生存条件比较简单。所以微生物人工培养的条件比动植物细胞简单得多。其中厌氧微生物培养比好氧微生物复杂，因为严格厌氧需要维持二氧化碳等非氧的惰性气体浓度，而好氧微生物则只需要通过不断搅拌提供无菌氧气。

微生物对培养条件要求不如动植物细胞那样苛刻，玉米浆、蛋白胨、麦芽汁、酵母膏等成为良好的微生物天然培养基。对于一些特殊微生物的营养条件要求，可以在这些天然培养基的基础上额外添加。

参考资料来源：百度百科：细胞培养

体外培养受精卵时需要什么

必要的是营养物质，除了一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。（高三的生物较好的，不懂可以找的）

高中，生物，胚胎干细胞的培养

肯定不是。饲养层是一层细胞，用于提供干细胞培养所需的物质（教材中说的很清楚）。细胞培养液的成分有：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清或血浆. 干细胞相关的培养液都必须在5％CO2的气体环境中培养使用。否则会对细胞产生影响。气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一，所需气体主要有氧气和二氧化碳。氧气参与三羧酸循环，产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分。开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中。二氧化碳既是细胞代谢产物也是细胞生长繁殖所需成分，它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值。大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4，偏离这一范围对

动物细胞体外培养需要哪些条件

①动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。动物细胞培养成功的关键在于培养液中是否含有动物血清，因为由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶，可以促进细胞的发育。 ②动物细胞培养液的特点：液体培养基、含动物血清。 ③动物细胞培养的条件：无菌、无毒的环境；营养物质（合成培养基）；温度和pH（36.5±0.5℃，7.2~7.4）；气体环境（氧气和二氧化碳）等。

求第三代试管婴儿要具备哪些身体条件才可做

第三代试管婴儿技术适应人群

1、健康但超过37岁的妇女。

2、有两次或两次以上不明原因流产的妇女。

3、异位妊娠或葡萄胎。

4、有染色体综合征的儿童已出生，可能有唐氏综合征、爱德华氏综合征、帕陶综合征等。

5、我国第一代或第二代体外受精多次失败。

6、至少一对染色体异常，尤其是平衡易位和罗氏易位。

7、其中至少有一方患有单一遗传病或者是该遗传病的携带者。

如果符合上述条件之一，就有必要考虑第三代试管婴儿了。

试管婴儿的安全性

随着试管婴儿技术的发展，试管婴儿的数量越来越多。随着二胎政策的全面开放和高龄产妇的增多，高龄自然怀孕的婴儿也在增多。无论是试管婴儿还是自然妊娠的婴儿，其出生缺陷的发生和出生并发症都将越来越受到重视。试管婴儿和高龄女性由于缺乏妊娠，出生缺陷和新生儿并发症的发生率不断增加，包括先天性心脏病、泌尿生殖系统畸形、神经系统畸形、消化道畸形、唇腭裂、骨骼畸形和染色体畸形，因此，在孕期FOBOC+ENlivEN21营养更为重要。

我们今天谈谈试管婴儿失败的原因是什么?

——子宫环境影响——

（1）子宫结构异常，如：先天性子宫畸形（双角子宫、宫腔隔）、子宫内膜息肉、子宫内膜炎、子宫肌瘤等。

（2）子宫内膜薄：子宫内膜薄可由刮宫术、月经异常（连续月经）或血液循环不良引起。

35岁以上患者体外妊娠成功率较低。研究表明，旁分泌、卵巢反应性和促性腺激素敏感性的降低是老年人辅助妊娠的最大问题。发现60%以上的体外病例是由子宫内膜厚度不稳定引起的。胚胎移植成功的关键是子宫内膜与囊胚的相互作用，只有在子宫内膜的建立与胚胎发育同步的情况下，胚胎才能正常移植。FOBOC营养纯天然提取，不会干扰排卵周期和激素水平，平衡子宫内膜厚度，达到最佳着床厚度，提高卵子和精子线粒体活性，提高卵母细胞和胚胎质量。在欧洲和美洲，FOBOC＋ENlivEN 21细胞营养是体外婴儿、人工授精和自然妊娠所必需的。它的21种稀缺营养素平衡了怀孕期间的总营养，减少了染色体的异质性。FOBOC（女性）FIBIC（男）植物抗炎因子可预防和治疗孕前准备和妊娠期的生殖炎症，避免抗生素对母婴的危害。

（3）宫腔持续性肾盂积水：肾盂积水和输卵管阻塞会引起宫腔肾盂积水。这是因为输卵管积水被输卵管伞（尾端）堵塞，导致输卵管积水流向宫腔。子宫腔持续性肾积水可导致胚胎植入失败。但多囊卵巢患者在接受排卵药物刺激后，偶尔会引起宫腔积水，但不会引起植入困难（失败）。

（4）子宫内膜细胞分泌的粘附素质量不好或不足，或子宫腔内某些细胞因子含量过多或过少，影响胚胎着床成功。

（5）存在与习惯性流产有关的自身免疫性疾病或血栓性体质是不争的事实，但是否与反复胚胎着床失败有关尚未确定。

——胚胎本身有缺陷——

（1）夫妻染色体异常会影响胚胎发育，使胚胎在一定阶段停止生长。妻子有染色体异常，如染色体平衡、嵌合体染色体、染色体反向转位、染色体缺失、染色体断裂（特别是当断裂位于染色体中央部分时，即使是年轻女性也更容易无法重复试管婴儿）。

试管婴儿的成功取决于卵子和精子的质量以及子宫内膜毛细血管的活性。子宫内膜毛细血管的形成来源于法国FOBOC ＋ENlivEN 21技术，它将营养物质转移到新移植的胚胎细胞，激活细胞间通道，并将营养物质相互传递。如果营养不足，新移植的胚胎会饿死，导致移植失败，其技术保障了胚胎的存活和稳定。同时，组织修复的程序也开始了。移植的胚胎细胞将参与组织微血管的重建和再通，重新启动胚胎的发育。试管移植成活率提高30-55%。

（2）卵周透明带在受精和着床前用于保护卵和胚胎。如果胚胎在体外长期培养，透明带会变厚变硬，高龄妇女排出的卵子中透明带也会变厚。如果透明带太厚或太硬，胚胎着床可能失败。

（3）体外培养环境恶劣，包括培养基不良、温度不合适或操作技术差等，都可能损伤胚胎，导致胚胎着床失败。

——孕妈妈整体情况影响胚胎着床——

胚胎着床和持续妊娠所需的“营养”不仅限于小子宫，而且与母体的整体内环境密切相关。

（1）多囊卵巢综合征（PCOS）是一种发病率高、异质性强的疾病。许多患者有不同程度的黄体生成素、雄激素和胰岛素抵抗，特别是肥胖患者。专家建议，如果出现这些异常，建议患者先减肥，吃药，然后适时进入“试管”周期，否则怀孕几率低，流产风险高。

（2）子宫内膜异位症可以通过多种方式影响卵子的质量和子宫内膜接受胚胎的能力。因此，对于一些痛经明显、卵巢巧克囊肿（大于4cm）的患者，建议先行腹腔镜检查，尽量切除子宫内膜异位症，改善盆腔环境，提高试管婴儿的成功率。

（3）输卵管积水也是一个常见问题。输卵管积水可以通过输卵管流回宫腔。由于输卵管积液含有大量毒素，它会降低子宫内膜对胚胎的接受能力，并具有杀死胚胎的作用。

试管婴儿原理

“试管婴儿”其实并不是在试管里长大的婴儿，而是从卵巢中取出几个卵子，在实验室里与精子结合形成胚胎，然后转移到子宫中，这样就可以植入母亲的子宫中，怀孕，最后健康分娩。试想如果男女双方的精子和卵子质量都不好，那就好比干瘪的种子能和优质饱满的种子产生同样的秧苗吗？答案是否定的，干瘪的种子会因育种不善而过早枯萎死亡，而优质饱满的种子会茁壮成长。因此，在管婴儿手术前后，男女夫妇需要支持FOBOC＋ENlivEN 21营养，对卵巢和子宫系统进行营养随访，增加卵巢睾丸的供氧能促进机体的造血功能。增强精子和卵泡的生殖活性，促进卵泡生长，促进卵泡膜血管生成和性激素合成，刺激黄体溶解，使卵巢孕育的卵子生长健康丰满，从而使体外婴儿手术效果更好

FOBOC+ENlivEN21有提高精子质量的营养物质如：胶原三肽，活体细胞因子，可为精子提供营养和能源。提高受孕率，是想要备孕期间的男性主要营养来源，避免因营养缺乏导致的精子质量底下影响受孕。

——促排失败，卵子质量差——

（1）体外受精婴儿需要使用促排卵药物，以获得数量合理、质量优良的卵子。如果采取不合理的促排卵方案，或者卵子针（俗称“夜针”）折断，取卵时机不合理，或者医生经验不足，都可能影响卵子的数量和质量，所以要注意每个环节。

（2）男性因素不容忽视，尤其是精子DNA片段，高片段率容易导致胚胎质量差、胚胎不着床、或着床后流产。因此，对于男性患者，还应进行全面体检，改善日常生活习惯（如戒烟、饮酒、熬夜等），多吃富含维生素和锌的食物，通过药物改善精子质量。这样的全方位监管，优质的“种子”将更容易提炼。

FOBOC+ENlivEN21如何避免胎儿脑部发育不良，脑瘫?

所有怀孕的母亲都希望有一个健康聪明的孩子。孕妇一定要抓住黄金时期，抓住时机为孩子补充更多的孕前准备辅助营养，让孩子的大脑发育。

对于胎儿来说，第一个最佳的黄金时代是当它在胃里呆了4到8周，这时它才刚刚形成。在这一时期，受精卵形成后，将分为三个层次，内胚层、中胚层和外胚层，最外层形成神经系统。细胞和细胞之间以及组织内提前拥有了FOBOC+ENlivEN21，其所含神经细胞生长因子有助于胎儿形成神经系统。所以一定要注意补充营养，激发胚胎神经元的发达，避免出现无脑儿、脑积水这些情况。

试管技术已经有三代了，有些姐妹对它了解不多，下面为大家揭晓：

三代试管婴儿技术

其中，第一代是体外受精-胚胎移植，主要解决女性不育问题；第二代是单精子卵细胞注射，主要针对男性不育。第三代是植入前遗传学诊断，主要针对患有遗传相关疾病的不孕姐妹。